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細(xì)說一下標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清解凍有哪些注意事項(xiàng)

更新時(shí)間:2022-06-22   點(diǎn)擊次數(shù):855次
  標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清用作真核細(xì)胞體外細(xì)胞培養(yǎng)的生長(zhǎng)補(bǔ)充劑。動(dòng)物血清(牛血清和其它動(dòng)物血清)都用于細(xì)胞培養(yǎng),其中使用*泛的是標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清。FBS含有生長(zhǎng)因子和極低水平的抗體,因此在許多不同的細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用中具有多功能性。在FBS中發(fā)現(xiàn)了1000多種成分,包括蛋白質(zhì),電解質(zhì),脂質(zhì),碳水化合物,激素,酶和其他不確定的成分,這些成分在許多培養(yǎng)條件下對(duì)于支持細(xì)胞生長(zhǎng)都是必需的。
 
  標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清是新鮮的胎牛全血,通過剖腹產(chǎn)對(duì)胎牛心臟進(jìn)行閉式穿刺獲得。在自然層析和離心后,收集得到淡黃色透明上清液,去除血細(xì)胞、纖維蛋白和其他成分。生產(chǎn)完成后,采用多級(jí)高壓膜過濾技術(shù)和三級(jí)0.1µm末端微濾法進(jìn)行處理。它通常用于細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)。那么,如何儲(chǔ)存和解凍胎牛血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
 
  未拆封的血清,一般情況下應(yīng)存放于-10℃至-20℃,在產(chǎn)品規(guī)定的效期內(nèi)均可使用,若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至合適大小的無菌離心管內(nèi),再放回冷凍。
 
  將血清從冷凍冰箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融,或通過水浴鍋促使其溶解。但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。*溶解后建議盡快使用,若長(zhǎng)時(shí)間儲(chǔ)存在2-8℃,血清中的各種(脂)蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能因凝集而形成沉淀或可見的混濁。
 
  解凍標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清時(shí),請(qǐng)按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。解凍胎牛血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。請(qǐng)勿將胎牛血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,胎牛血清會(huì)變得混濁,同時(shí)胎牛血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響胎牛血清的質(zhì)量。胎牛血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。若必須做胎牛血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。

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