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關(guān)于人胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題解答
更新時(shí)間:2019-11-18 點(diǎn)擊次數(shù):1544次
人胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)elisa試劑盒是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(elisa)。往預(yù)先包被人胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測(cè)抗體,經(jīng)過(guò)溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過(guò)氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。
人胎盤生長(zhǎng)因子(PLGF)檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)中遇到的問(wèn)題解答
一、洗板
也許因素:
1)選用手藝洗板,孔與孔之間液體穿插。
2)選用半自動(dòng)洗板機(jī)洗板時(shí),洗液量不足,致使洗板不*;洗板針阻塞,抽吸不*;洗板不暢,致使洗板作用差。
3)反響板過(guò)多形成洗板等待時(shí)刻長(zhǎng)。
解決辦法:
1)確保洗液注滿各孔,洗板針疏通,洗完板后在吸水紙(挑選潔凈、無(wú)或少塵的吸水資料)上輕輕拍干;
2)合理安排,或多用幾臺(tái)洗板機(jī)。
二、顯色
ELISA試劑盒也許因素:
1)顯色劑制造后放置時(shí)刻過(guò)長(zhǎng)或運(yùn)用過(guò)期顯色劑;
2)加顯色劑時(shí)濺起孔外形成液體回流。
解決辦法:
1)顯色劑盡量在臨用前制造,堅(jiān)持不必過(guò)期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不必;
2)加樣時(shí)堅(jiān)持顯色劑不外流;
3)A、B液應(yīng)防止觸摸金屬器械。
三、停止
也許因素如加停止液時(shí)發(fā)生較多氣泡,致使假陽(yáng)性添加。所以在加停止液時(shí)應(yīng)防止發(fā)生氣泡。
四、讀板
ELISA試劑盒如讀板時(shí)板底不清洗等。應(yīng)確保酶標(biāo)板清洗。所以在全部操作過(guò)程中確保酶標(biāo)板不觸摸次氯酸;盡也許完成ELISA檢查規(guī)范自動(dòng)化,有用進(jìn)步檢查質(zhì)量。