人腫瘤壞死因子α是一種致炎性細(xì)胞因子，主要由單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞及胸腺依賴淋巴細(xì)胞(簡稱T細(xì)胞)產(chǎn)生，通過與其受體結(jié)合，在免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)、T細(xì)胞介導(dǎo)的組織損傷、慢性炎癥的發(fā)生發(fā)展等方面產(chǎn)生重要作用。TNF-α抑制劑主要通過阻斷TNF-α與其受體結(jié)合，從而阻止相關(guān)疾病的發(fā)生。
 

　　使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)胞刺激，收集血液后，3000轉(zhuǎn)離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離，3000轉(zhuǎn)離心30分鐘取上清，將組織加入適量生理鹽水搗碎。人腫瘤壞死因子α保存在2-8℃，使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶，這屬于正常現(xiàn)象，水浴加熱使結(jié)晶*溶解后再使用，實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封保存。濃度為0的S0號標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對照或者空白，按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍，zui終結(jié)果乘以5才是樣本實(shí)際濃度。
 

　　加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化成為有色產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)呈色的深淺進(jìn)行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的敏感度。ELISA可用于測定抗原，也可用于測定抗體。分子的大小由分子量來體現(xiàn)，小分子量容易穿透結(jié)構(gòu)致密、滲透性低的組織；而大分子量則只能進(jìn)入結(jié)構(gòu)稀松的、滲透性高的組織。