人抗平滑肌抗體ELISA試劑盒樣本處理及要求說明
更新時(shí)間:2019-12-23 點(diǎn)擊次數(shù):866次
人抗平滑肌抗體(ASMA)是以機(jī)體平滑肌組織為抗原的一種自身抗體,無器官及種屬特異性,主要為IgG和IgM類型。鼠肝、腎、人甲狀腺和血小板等組織與平滑肌的肌動(dòng)球蛋白具有共同的抗原性。因此用純化的肌漿球蛋白為抗原可進(jìn)行沉淀試驗(yàn)、間接血凝試驗(yàn)、放射免疫測(cè)定和酶免疫技術(shù)檢測(cè)SMA。但目前zui常用的是以平滑肌為抗原片的間接免疫熒光法。
人抗平滑肌抗體(ASMA)是抗肌動(dòng)球蛋白的自身抗體。一般采用IFA法,以大鼠胃作為抗原基質(zhì),陽性可見胃壁平滑肌呈現(xiàn)亮綠色熒光。ASMA是自身免疫性肝炎的血清學(xué)標(biāo)志抗體醫(yī)學(xué)教育|網(wǎng)搜集整理。在其他肝病例如肝外膽汁淤滯、藥物誘發(fā)性肝病、急性病毒性肝炎以及肝癌患者中檢出率很低。其他疾病如傳染性單核細(xì)胞增多癥、SS、RA、支原體肺炎、腫瘤和病毒感染者也有不同程度的陽性率。正常人中僅有2%陽性。
人抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1.血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜,然后1000×g離心20分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.組織勻漿:用預(yù)冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測(cè)。
4.細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請(qǐng)1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測(cè),或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。