目的:檢測BMP-2在人類鞏膜成纖維細(xì)胞(HSF)中的表達(dá),及人重組BMP-2(rhBMP-2)對HSF增殖,基質(zhì)金屬蛋白酶-2(MMP-2)和金屬蛋白酶抑制劑-2(TIMP-2)的影響。
方法:我們采用激光掃描共聚焦顯微鏡(CFM)觀察BMP-2在HSF及鞏膜中的分布。用MTT法分析不同濃度的rhBMP-2 對細(xì)胞增殖的作用。用流式細(xì)胞檢測分析rhBMP-2對細(xì)胞周期的影響。用RT–PCR 和ELISA測定由rhBMP-2引起的MMP-2、TIMP-2的mRNAs和HSF分泌蛋白的改變。
結(jié)果:BMP-2蛋白在人類鞏膜上表達(dá),rhBMP-2的濃度在100 ng/ml時(shí),細(xì)胞增殖表現(xiàn)zui為明顯,具有時(shí)間依從性(p<0.05)。和對照組比較,受rhBMP-2誘導(dǎo)的HSF周期移至細(xì)胞合成期或有絲分裂期。在rhBMP-2中培養(yǎng)24小時(shí)后,HSF中TIMP-2的表達(dá)明顯增加(p<0.01)。在rhBMP-2中培養(yǎng)48小時(shí)后,TIMP-2的mRNA和蛋白表達(dá)顯著增加,而MMP-2的mRNA和蛋白表達(dá)顯著減少(p<0.01)。
結(jié)論:BMP-2在HSF中表達(dá),且可促進(jìn)細(xì)胞增殖,引起MMP-2和TIMP-2改變,可能影響鞏膜細(xì)胞外基質(zhì)合成。
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