隨著科學(xué)技能和新式工業(yè)的發(fā)展,對(duì)化學(xué)試劑的純度、凈度以及精密度要求愈加嚴(yán)格和專門化。對(duì)試劑的加強(qiáng)管理。免疫檢測(cè)法的精確性表現(xiàn)為單次試驗(yàn)孔間(批內(nèi))的重復(fù)性和多次試驗(yàn)之間(批間)的重復(fù)性。CV值高則表明精確度低,半抗原偶聯(lián)試劑盒一般由以下兩個(gè)原因造成:洗刷技能和移液技能。
一、洗刷技能:
1.假如運(yùn)用自動(dòng)洗板機(jī)或多通道移液器,請(qǐng)保證進(jìn)出口能正常運(yùn)作。
2.最后一次洗刷后,翻轉(zhuǎn)酶標(biāo)板倒出剩余的洗刷液,并在吸水紙上拍干液體。洗板太快或太慢都會(huì)降低精確度。不能讓孔內(nèi)液體天然風(fēng)干,需立即進(jìn)行下一步操作。
3.依照闡明書,添加足量的洗刷液至孔內(nèi),并保證洗刷*。
4.由于洗刷液不是通用的,當(dāng)試劑盒內(nèi)的洗刷液用完時(shí),請(qǐng)不要運(yùn)用其他試劑盒中的洗刷液。如有需求,可聯(lián)絡(luò)技能支持尋求協(xié)助。
5.不要減少洗刷時(shí)的浸泡時(shí)間或越過浸泡的過程。
6.依照闡明書上引薦的洗刷次數(shù)清洗,隨意改變洗刷的次數(shù)會(huì)影響試驗(yàn)的精確性。
二、移液技能:
1.移液時(shí),槍頭應(yīng)對(duì)準(zhǔn)孔中央,防止接觸孔壁及底部。
2.移液后輕輕晃動(dòng)混勻試劑。
3.假如您的樣品具有黏性,請(qǐng)預(yù)先潤(rùn)洗槍頭以消除表面張力的影響。吸液時(shí)等待頃刻使體積平衡后再取出。
4.移液不充分或移液體積不均,闡明移液器需求校正。必要時(shí)請(qǐng)查看移液器并重新校正。
5.加樣時(shí),不同的試劑標(biāo)準(zhǔn)品和樣本間都要保證更換槍頭,防止穿插污染。
6.保證運(yùn)用適宜的槍頭。半抗原偶聯(lián)試劑盒不適宜的槍頭無法正確量取吸液和加樣的體積。
三、封板覆膜:
運(yùn)用過的封板覆膜可能含有上一步試驗(yàn)殘留的試劑,假如重復(fù)運(yùn)用會(huì)造成孔板污染,從而導(dǎo)致精確性低。建議每一次孵育運(yùn)用新的封板覆膜。
四、貯液瓶:
為防止污染,不同的試劑運(yùn)用不同的貯液瓶。一些試劑或樣本很容易被污染(比如唾液、氧化劑等),請(qǐng)參考闡明書操作。必要時(shí)候采納一些預(yù)防措施維護(hù)溶液。
半抗原偶聯(lián)試劑盒血清解凍操作技巧:
1)請(qǐng)勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會(huì)因此受到損害,而影響血清的質(zhì)量。
2)按照所建議的逐步解凍法(-2O℃至4℃至室溫),若血清解凍時(shí)改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實(shí)驗(yàn)顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。
3)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
4)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
5)若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻,溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。