標準胎牛血清需要保存的血清必須儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。
由于標準胎牛血清來源的特殊性,這使得選擇血清也成為了一門技術(shù)活。那么如何來甄別和選擇標準胎牛血清呢?
1.看產(chǎn)地
受供體飼養(yǎng)環(huán)境、生產(chǎn)工藝等因素的影響,原產(chǎn)澳洲、新西蘭的血清是目前品質(zhì)較高的血清來源。雖然北美洲的血清質(zhì)量也較高,但受yi情及國家進口政策的限制,目前尚無正規(guī)渠道購買北美的血清產(chǎn)品。
2.看外觀
1)顏色:根據(jù)血紅蛋白含量的不同,可表現(xiàn)出黃色或紅色,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清質(zhì)量并無直接影響,這個指標的意義在于能體現(xiàn)出采血過程的嚴謹規(guī)范程度。標準胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。
2)澄清度:高質(zhì)量的標準胎牛血清由于蛋白和脂類等物質(zhì)含量低,表現(xiàn)為稀薄、清淡,而新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深。
3)血清沉淀:血清有沉淀,是質(zhì)量問題?血清中的沉淀是由纖維蛋白的凝聚產(chǎn)生,對血清質(zhì)量沒有任何影響,沉淀的產(chǎn)生原因很多,跟加工生產(chǎn)方式、是否反復(fù)凍融密切相關(guān)。雖然沉淀并不直接影響血清的質(zhì)量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3.看批間差異
采購血清要關(guān)注血清的批間差異。經(jīng)驗豐富的供應(yīng)商會制定嚴謹?shù)馁|(zhì)檢標準,確保血清篩選標準的一致性,盡可能降低血清的批間差異,盡可能消除因采血、生產(chǎn)、貯藏工藝不同而造成的批間差異。
總結(jié):適合自己細胞生長的才是好的。
血清的成分十分復(fù)雜,既有協(xié)助物質(zhì)運輸?shù)牡鞍?、營養(yǎng)物質(zhì),還有促進細胞生長的激素和因子等,正因為血清這種天然成分的復(fù)雜性,使得血清在細胞培養(yǎng)過程中發(fā)揮了多種功能:
1.提供維持細胞生長的激素,促進所培養(yǎng)細胞的生長;
2.彌補基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或含量很少的營養(yǎng)物質(zhì);
3.提供結(jié)合蛋白,促進細胞識別和利用維生素、脂類和其他激素等;
4.某些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用;
5.促進細胞貼壁,提供可促進細胞鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)的因子;
6.起酸堿度緩沖液作用;
7.提供蛋白酶抑制劑,使細胞消化時殘留的失活,保護細胞不受傷害。